“我们不能跟着别人的思路对‘风暴’进行控制，那到应用时会遇到‘专利门槛’。”杨光华说，为此，他带领团队从2009年开始从另一个角度入手，试图给T细胞加个“遥控器”，增加CAR-T技术中人们对T细胞的控制力。
“慢病毒载体是人们进行基因工程操作的一个有效工具。”杨光华说，慢病毒载体和病毒一样能够“侵入”细胞，但并不具有毒性，能把目标片段插入目标细胞中，从而实现基因的改造。
要把病毒“驯化”成友军并不容易，临床要求严格，并且大规模生产和纯化非常困难。杨光华团队试图通过慢病毒载体对CAR-T进行改良，并使其实现工业化生产，同时依托该技术成立了上海比昂生物医药科技有限公司。“不同于常见的化学合成药物，基因药物的大规模生产与纯化非常困难。目前在基因载体大规模生产上，比昂生物的纯化率已经比国际同行的高10倍。”杨光华说，慢病毒载体的生产包含了质粒获取、细胞转染、病毒收集与纯化等一系列复杂的步骤，每一个步骤都会影响最后获得的载体活性，因此需要在工艺上不断优化，才能得到高质量的载体。
在转导过程中，团队对载体用量、转导条件、T细胞培养、增强剂的使用等关键条件进行了探索与优化，最后取得成功。“所有的技术都已申请了专利。核心发明专利已经由国际专利体系PCT授权。”杨光华说，“我们同时具有病毒类载体大规模生产工艺专利技术，可满足国内外制药公司、医院等对CAR-T可诱导慢病毒的需要，用于Ⅰ期和Ⅱ期的临床实验。”
体外实验证明，“四环素调控系统”高效
“开关系统通过基因合成、酶切连接等分子生物学技术，我们将‘四环素调控系统’与CD19-CAR结构一起整合进慢病毒载体中。”杨光华说，这样在对T细胞进行CAR改造的同时，“四环素遥控器”也就同步装配了。
新华社南京10月17日电（记者秦华江）2018年6月5日至7月5日，中央第四环境保护督察组对江苏省第一轮中央环境保护督察整改情况开展“回头看”，针对大气污染问题统筹安排专项督察，并形成督察意见
